Bromofenol mavisi (BPB), pH 3,0’ın altında sarıya ve pH 4,6’nın üzerinde maviye dönen bir pH göstergesidir. Moleküler biyolojide DNA elektroforezi için izleme boyası olarak yaygın olarak kullanılır.
| IUPAC Adı | 3′,3″,5′,5″-tetrabromofenol sülfoneftalein |
| Moleküler formül | C19H10Br4O5S |
| CAS numarası | 115-39-9 |
| Eş anlamlı | 3′,3′,5′,5′-tetrabromofenol sülfonftalein, TBB, bromofenol mavisi sodyum tuzu ve bromofenol mavisi serbest asit |
| InChI | InChI=1S/C19H10Br4O5S/c20-13-5-1-12(2-6-13)19(11-24)27(25,26)17-9-15(29(21,22)23)7- 3-14(17)18(10-16(19)30(25,26)28)31(4-8-32(25,26)27)33(34)35/h1-10,24H,11H2, (H,21,22,23) |
Bromofenol Mavi Molar Kütle
BPB’nin molar kütlesi 669,96 g/mol’dür. Molar kütle, bir maddenin bir molünün mol başına gram cinsinden ifade edilen kütlesini ifade eder. Bir bileşiğin molar kütlesi, onu oluşturan atomların her birinin atomik kütleleri toplanarak hesaplanabilir. BPB, karbon, hidrojen, oksijen, kükürt ve brom atomları içeren karmaşık bir organik bileşiktir ve molar kütlesi, bu elementlerin her birinin atomik kütlelerinin bileşiğe eklenmesiyle hesaplanır.
Bromofenol mavisinin kaynama noktası
BPB’nin kaynama noktası yaklaşık 600°C’dir. Bir maddenin kaynama noktası, maddenin buhar basıncının atmosfer basıncına eşit olduğu sıcaklıktır. Bu sıcaklıkta sıvı gaz haline geçer. BPB, büyük boyutu ve karmaşık yapısı nedeniyle yüksek kaynama noktasına sahiptir ve molekülleri bir arada tutan moleküller arası kuvvetleri parçalamak için önemli miktarda enerji gerektirir.
Bromofenol mavisi Erime noktası
BPB’nin erime noktası yaklaşık 218°C’dir. Bir maddenin erime noktası, maddenin katı formunun sıvı formuna dönüştüğü sıcaklıktır. BPB’nin erime noktası, kristal kafeste mevcut olan güçlü moleküller arası kuvvetler nedeniyle nispeten yüksektir.
Bromofenol mavisi Yoğunluk g/ml
BPB’nin yoğunluğu yaklaşık 1,8 g/ml’dir. Yoğunluk, bir maddenin birim hacmi başına kütle miktarını tanımlayan fiziksel bir özelliktir. BPB’nin yoğunluğu karmaşık yapısından dolayı nispeten yüksektir ve birim hacim başına yüksek kütleye neden olur.
Bromofenol Mavisi Molekül Ağırlığı
BPB’nin moleküler ağırlığı 669,96 g/mol’dür. Molekül ağırlığı, bir moleküldeki tüm atomların atom ağırlıklarının toplamıdır. Bir maddenin moleküler ağırlığı, belirli bir çözelti konsantrasyonunu hazırlamak için gereken madde miktarının belirlenmesi gibi çeşitli hesaplamalarda kullanılır.
Bromofenol mavisinin yapısı
BPB, dört brom atomu, iki fenol grubu ve bir sülfonat grubu içeren bir sülfoneftalein yapısına sahiptir. Molekülün iki fenol grubuna ve bir sülfonat grubuna bağlı merkezi bir karbon atomu vardır. Molekül ayrıca fenol gruplarının her birine bağlı iki brom atomu içerir. Sülfonat grubu negatif yüklüdür ve bu da BPB’yi suda çözünür bir boya haline getirir.
Bromofenol Mavisi Formülü
BPB’nin kimyasal formülü C19H10Br4O5S’dir. Formül, mevcut atomların sayısı ve türü açısından molekülün bileşimini temsil eder. Formül, BPB’nin 19 karbon atomu, 10 hidrojen atomu, dört brom atomu, beş oksijen atomu ve bir kükürt atomu içerdiğini gösterir.
| Dış görünüş | Koyu mavi kristaller veya toz |
| Spesifik yer çekimi | 1,82 – 1,85 g/cm³ |
| Renk | Koyu mavi |
| Koku | Kokusuz |
| Molar kütle | 669,96 gr/mol |
| Yoğunluk | 1,8 g/cm³ |
| Füzyon noktası | ~218°C |
| Kaynama noktası | ~600°C |
| Flaş noktası | Uygulanamaz |
| sudaki çözünürlük | Suda çözünebilir |
| çözünürlük | Etanol, DMSO ve DMF’de çözünür |
| Buhar basıncı | Uygulanamaz |
| Buhar yoğunluğu | Uygulanamaz |
| pKa | 4.0–5.6 |
| pH | 3,0 (sarı)–4,6 (mavi) |
Bromofenol mavisinin güvenliği ve tehlikeleri
BPB doğru kullanıldığında nispeten güvenli bir bileşiktir. Kanserojen, mutajenik veya teratojenik olarak sınıflandırılmamıştır. Ancak tüm kimyasallarda olduğu gibi BPB’yi kullanırken de uygun önlemlerin alınması önemlidir. Bu, temas halinde ciltte ve gözde tahrişe neden olabilir. Yutma bulantı ve kusmaya neden olabilir. Cilt ile teması halinde bol sabun ve su ile yıkayınız. Göz ile teması halinde bol su ile birkaç dakika yıkayın. BPB’yi kullanırken toz veya buharların solunmasından kaçınmak ve eldiven ve gözlük gibi uygun koruyucu ekipmanların kullanılması da önemlidir.
| Tehlike sembolleri | Hiçbiri |
| Güvenlik Açıklaması | S24/25 – Cilt ve gözlerle temasından kaçının |
| S36/37/39 – Uygun koruyucu kıyafet, eldiven ve gözlük kullanın | |
| BM kimlik numaraları | Düzenlenmemiş |
| HS kodu | 2934.99.9000 |
| Tehlike sınıfı | sınıflandırılmamış |
| Paketleme grubu | Uygulanamaz |
| Toksisite | LD50 (oral, sıçan): > 5.000 mg/kg |
Bromofenol mavisinin sentezi için yöntemler
Bromofenol mavisini sentezlemek için çeşitli yöntemler vardır.
Yaygın bir yöntem, sodyum hidroksit varlığında 3,5-dibromo-4-hidroksibenzaldehid ile 4-aminofenol arasındaki reaksiyondur. Bu reaksiyon, mavi-yeşil bir katı formunda bromofenol mavisinin oluşumuna yol açar. Ürün su veya etanolden yeniden kristalleştirme yoluyla saflaştırılabilir.
Başka bir yöntem, asetik anhidrit ve sülfürik asit varlığında 4-dimetilaminobenzaldehit ile 3,5-dibromosalisilik asit arasındaki reaksiyonu içerir. Bu reaksiyon, etanolden yeniden kristalleştirme yoluyla saflaştırılabilen mavi bir katı halinde bromofenol mavisini verir.
Başka bir yöntem, sodyum hidroksit varlığında 3,5-dibromo-4-hidroksibenzoik asit ile 4-aminofenol arasındaki reaksiyonu içerir. Bu reaksiyon, su veya etanolden yeniden kristalleştirme yoluyla saflaştırılabilen mavi-yeşil bir katının oluşumuna yol açar.
Bromofenol mavisinin kullanım alanları
Bromofenol mavisi benzersiz özelliklerinden dolayı farklı alanlarda birçok kullanıma sahiptir. Bromofenol mavisinin ana kullanımlarından bazıları şunlardır:
- Biyolojik Boyama: Elektroforez uygulamalarında biyolojik boya olarak kullanılır. Jel elektroforezi sırasında protein veya nükleik asit göçünün ilerlemesini izlemek için izleme boyası olarak kullanılır.
- pH göstergesi: pH 3,0 ile 4,6 arasında bir geçiş aralığına sahip bir pH göstergesi olarak kullanılır. Çözeltinin pH’ı arttıkça rengi sarıdan maviye döner.
- Kimyasal İndikatörler: Çözeltilerdeki zayıf asit ve bazların varlığını tespit etmek için kimyasal indikatör olarak kullanılır. Asit-baz titrasyonlarının bitiş noktasını belirlemek için kullanılır.
- Laboratuvar Reaktifi: Laboratuvar deneylerinde, özellikle protein konsantrasyonunun belirlenmesini içerenlerde reaktif olarak kullanılır.
- Tıbbi Uygulamalar: Tıbbi uygulamalarda teşhis aracı olarak kullanılır. İdrardaki proteini test etmek veya böbrek diyalizinin etkinliğini izlemek için kullanılır.
Genel olarak bromofenol mavisi, biyoloji, kimya ve tıp dahil olmak üzere çeşitli alanlarda geniş bir uygulama yelpazesine sahip çok yönlü bir bileşiktir.
Sorular:
S: Bireysel DNA örneklerine neden bromofenol mavisi ekleniyor?
C: Bromofenol mavisi genellikle jel elektroforez deneylerinde ayrı ayrı DNA örneklerine izleme boyası olarak eklenir. Araştırmacıların jel boyunca DNA göçünün ilerleyişini izlemelerine ve DNA’nın jelin sonuna ne zaman ulaştığını belirlemelerine olanak tanıyor.
S: Numune tamponundaki bromofenol mavisinin sarı görünmesine neden olan şeyin ne olduğunu düşünüyorsunuz ve neden?
C: Numune tamponundaki BPB, asidik formda olduğundan sarı renkte görünür. Bromofenol mavisi, çözeltinin pH’ı arttıkça rengi sarıdan maviye değiştiren bir pH göstergesidir. Numune tamponunda pH genellikle asidiktir ve bromofenol mavisinin sarı görünmesine neden olur.
S: Kullanılan numunelerde bulunan bromofenol mavisi boyası nedir?
C: Örneklerde bulunan bromofenol mavisi boyasının amacı, jel elektroforez deneyleri sırasında DNA göçünün ilerlemesini izlemektir. Bromofenol mavisi, araştırmacıların DNA’nın jel içindeki hareketini görmesine ve DNA’nın jelin sonuna ne zaman ulaştığını belirlemesine olanak tanıyan bir izleme boyası görevi görüyor. Bu, deneyin planlandığı gibi yürütülmesini sağlamaya yardımcı olur ve araştırmacıların deneyin sonuçlarını analiz etmesine olanak tanır.