O azul de bromofenol (BPB) é um indicador de pH que fica amarelo abaixo de pH 3,0 e azul acima de pH 4,6. É comumente usado em biologia molecular como corante de rastreamento para eletroforese de DNA.
| Nome IUPAC | 3′,3″,5′,5″-tetrabromofenol sulfoneftaleína |
| Fórmula molecular | C19H10Br4O5S |
| Número CAS | 115-39-9 |
| Sinônimos | 3′,3″,5′,5″-tetrabromofenol sulfonftaleína, TBB, sal sódico de azul de bromofenol e ácido livre de azul de bromofenol |
| InChI | InChI=1S/C19H10Br4O5S/c20-13-5-1-12(2-6-13)19(11-24)27(25,26)17-9-15(29(21,22)23)7- 3-14(17)18(10-16(19)30(25,26)28)31(4-8-32(25,26)27)33(34)35/h1-10,24H,11H2, (H,21,22,23) |
Massa molar de azul de bromofenol
BPB tem massa molar de 669,96 g/mol. Massa molar refere-se à massa de um mol de uma substância, expressa em gramas por mol. A massa molar de um composto pode ser calculada somando as massas atômicas de cada um de seus átomos constituintes. BPB é um composto orgânico complexo que contém átomos de carbono, hidrogênio, oxigênio, enxofre e bromo, e sua massa molar é calculada adicionando as massas atômicas de cada um desses elementos no composto.
Ponto de ebulição do azul de bromofenol
O BPB tem um ponto de ebulição de aproximadamente 600°C. O ponto de ebulição de uma substância é a temperatura na qual a pressão de vapor da substância se iguala à pressão atmosférica. Nessa temperatura, o líquido passa para o estado gasoso. O BPB possui alto ponto de ebulição devido ao seu grande tamanho e estrutura complexa, necessitando de uma quantidade significativa de energia para quebrar as forças intermoleculares que mantêm as moléculas unidas.
Azul de bromofenol Ponto de fusão
O BPB tem um ponto de fusão de aproximadamente 218°C. O ponto de fusão de uma substância é a temperatura na qual a forma sólida da substância muda para a forma líquida. O ponto de fusão do BPB é relativamente alto devido às fortes forças intermoleculares presentes na rede cristalina.
Densidade azul de bromofenol g/ml
O BPB tem uma densidade de aproximadamente 1,8 g/ml. Densidade é uma propriedade física que descreve a quantidade de massa por unidade de volume de uma substância. A densidade do BPB é relativamente alta devido à sua estrutura complexa, resultando em uma elevada massa por unidade de volume.
Peso molecular do azul de bromofenol
O peso molecular do BPB é 669,96 g/mol. O peso molecular é a soma dos pesos atômicos de todos os átomos de uma molécula. O peso molecular de uma substância é utilizado em vários cálculos, como na determinação da quantidade de substância necessária para preparar uma determinada concentração de uma solução.
Estrutura do azul de bromofenol
O BPB possui uma estrutura sulfoneftaleína que contém quatro átomos de bromo, dois grupos fenol e um grupo sulfonato. A molécula possui um átomo de carbono central que está conectado a dois grupos fenol e um grupo sulfonato. A molécula também contém dois átomos de bromo ligados a cada um dos grupos fenol. O grupo sulfonato tem carga negativa, tornando o BPB um corante solúvel em água.
Fórmula Azul de Bromofenol
A fórmula química do BPB é C19H10Br4O5S. A fórmula representa a composição da molécula em termos do número e tipo de átomos presentes. A fórmula indica que o BPB contém 19 átomos de carbono, 10 átomos de hidrogênio, quatro átomos de bromo, cinco átomos de oxigênio e um átomo de enxofre.
| Aparência | Cristais ou pó azuis escuros |
| Gravidade Específica | 1,82 a 1,85 g/cm³ |
| Cor | Azul escuro |
| Cheiro | Inodoro |
| Massa molar | 669,96 g/mol |
| Densidade | 1,8g/cm³ |
| Ponto de fusão | ~218°C |
| Ponto de ebulição | ~600°C |
| Ponto flash | Não aplicável |
| Solubilidade em Água | Solúvel em água |
| Solubilidade | Solúvel em etanol, DMSO e DMF |
| Pressão de vapor | Não aplicável |
| Densidade do vapor | Não aplicável |
| pKa | 4,0–5,6 |
| pH | 3,0 (amarelo)–4,6 (azul) |
Segurança e perigos do azul de bromofenol
BPB é um composto relativamente seguro quando manuseado corretamente. Não é classificado como cancerígeno, mutagênico ou teratogênico. No entanto, como acontece com todos os produtos químicos, é importante tomar as devidas precauções ao manusear o BPB. Isso pode causar irritação na pele e nos olhos ao entrar em contato. A ingestão pode causar náuseas e vômitos. Em caso de contato com a pele, lavar com bastante água e sabão. Em caso de contacto com os olhos, enxaguar com água abundante durante vários minutos. Também é importante evitar a inalação de poeiras ou vapores e utilizar equipamentos de proteção adequados, como luvas e óculos de proteção, ao manusear o BPB.
| Símbolos de perigo | Nenhum |
| Descrição de segurança | S24/25 – Evitar contato com pele e olhos |
| S36/37/39 – Use roupas, luvas e óculos de proteção adequados | |
| Números de identificação da ONU | Não regulamentado |
| Código SH | 2934.99.9000 |
| Classe de perigo | Não classificado |
| Grupo de embalagem | Não aplicável |
| Toxicidade | LD50 (oral, rato): > 5.000 mg/kg |
Métodos para a síntese de azul de bromofenol
Existem vários métodos para sintetizar o azul de bromofenol.
Um método comum é a reação entre 3,5-dibromo-4-hidroxibenzaldeído e 4-aminofenol na presença de hidróxido de sódio. Esta reação leva à formação do azul de bromofenol na forma de um sólido azul esverdeado. O produto pode ser purificado por recristalização em água ou etanol.
Outro método envolve a reação entre 4-dimetilaminobenzaldeído e ácido 3,5-dibromossalicílico na presença de anidrido acético e ácido sulfúrico. Esta reação dá o azul de bromofenol como um sólido azul, que pode ser purificado por recristalização em etanol.
Outro método envolve a reação entre o ácido 3,5-dibromo-4-hidroxibenzóico e o 4-aminofenol na presença de hidróxido de sódio. Esta reação leva à formação de um sólido azul esverdeado, que pode ser purificado por recristalização em água ou etanol.
Usos do azul de bromofenol
O azul de bromofenol tem muitos usos em diferentes campos devido às suas propriedades únicas. Aqui estão alguns dos principais usos do azul de bromofenol:
- Coloração Biológica: Usado como corante biológico em aplicações de eletroforese. Usado como corante de rastreamento para monitorar o progresso da migração de proteínas ou ácidos nucleicos durante a eletroforese em gel.
- Indicador de pH: utilizado como indicador de pH, com faixa de transição entre pH 3,0 e 4,6. Sua cor muda de amarelo para azul conforme o pH da solução aumenta.
- Indicadores Químicos: Utilizados como indicador químico para detectar a presença de ácidos e bases fracas em soluções. Usado para determinar o ponto final de titulações ácido-base.
- Reagente de Laboratório: Utilizado como reagente em experimentos de laboratório, principalmente aqueles que envolvem determinação de concentração de proteínas.
- Aplicações Médicas: Usado em aplicações médicas como ferramenta de diagnóstico. Usado para testar proteínas na urina ou para monitorar a eficácia da diálise renal.
No geral, o azul de bromofenol é um composto versátil com uma ampla gama de aplicações em vários campos, incluindo biologia, química e medicina.
Questões:
P: Por que o azul de bromofenol é adicionado a amostras individuais de DNA?
R: O azul de bromofenol é frequentemente adicionado a amostras individuais de DNA em experimentos de eletroforese em gel como corante de rastreamento. Ele permite que os pesquisadores acompanhem o progresso da migração do DNA através do gel e identifiquem quando o DNA atingiu o final do gel.
P: O que você acha que faz com que o azul de bromofenol no tampão da amostra pareça amarelo e por quê?
R: O BPB no tampão de amostra aparece amarelo porque está em sua forma ácida. O azul de bromofenol é um indicador de pH que muda de cor de amarelo para azul à medida que o pH da solução aumenta. No tampão de amostra, o pH é geralmente ácido, fazendo com que o azul de bromofenol pareça amarelo.
P: Qual é o corante azul de bromofenol presente nas amostras utilizadas?
R: O objetivo do corante azul de bromofenol presente nas amostras é monitorar o progresso da migração do DNA durante experimentos de eletroforese em gel. O azul de bromofenol serve como corante de rastreamento, permitindo aos pesquisadores ver o movimento do DNA através do gel e determinar quando o DNA atingiu o final do gel. Isso ajuda a garantir que o experimento seja executado conforme planejado e permite que os pesquisadores analisem os resultados do experimento.